J Hepatol丨鎖定MASLD脂質失控關鍵開關：MARCHF6促SREBP1降解，抑制肝脂肪變與纖維化！(冷泠/Juncheng Wei—北京協和/...

2026年5月21日，Temple University Lewis Katz School of MedicineJuncheng Wei團隊、北京協和醫院/中國醫學科學院北京協和醫學院冷泠團隊等，聯合Northwestern University、University of Illinois at Chicago、Southeast University等單位，在Journal of Hepatology（中科院1區TOP，2024 Impact Factor=33.0）在線發表題為“MARCHF6 orchestrates hepatic lipid homeostasis by targeting SREBP1 for ER-associated degradation”的研究論文。該文于2025年2月13日投稿，2026年4月21日修回，2026年4月27日接收。

MASLD/MASH的重要病理基礎之一是肝細胞內脂質過度合成與沉積，其中SREBP1是驅動肝臟從頭脂質合成的核心轉錄調控因子。既往研究已經提示SREBP1升高與MASLD進展密切相關，但位于內質網的全長SREBP1如何被及時清除，其翻譯后降解機制仍不清楚。本研究將目光聚焦于內質網相關降解通路（ERAD）中的E3泛素連接酶MARCHF6，提出MARCHF6可能是維持肝臟脂質穩態的關鍵“剎車”。

研究團隊構建了肝細胞特異性Marchf6敲除小鼠，并結合正常飼料、高脂飲食和西方飲食模型，同時在人肝癌細胞、原代肝細胞和人肝類器官中開展功能驗證。通過RNA-seq、蛋白質組學、免疫共沉淀、泛素化檢測、蛋白半衰期分析及AAV干預實驗，作者發現MARCHF6在MASLD小鼠模型和患者肝組織中顯著下調；一旦MARCHF6缺失，肝細胞脂滴明顯增加，脂肪酸合成和甘油三酯代謝相關基因上調，并進一步加重肝脂肪變、炎癥和纖維化。

機制上，MARCHF6可直接與SREBP1相互作用，并促進內質網定位的全長SREBP1發生泛素化和蛋白酶體降解。MARCHF6缺失后，SREBP1蛋白穩定性增強、半衰期延長，從而驅動過度從頭脂質合成。更關鍵的是，AAV介導的MARCHF6恢復表達能夠明顯緩解西方飲食誘導下Marchf6缺失小鼠的肝脂肪變和纖維化；沉默Srebf1也可顯著減輕MARCHF6缺失導致的脂質積累，說明SREBP1是MARCHF6調控肝臟脂質穩態的重要下游介質。

該研究提出了“Lipid–MARCHF6–SREBP1”反饋調控軸，將ERAD蛋白質降解系統與MASLD脂質代謝紊亂直接連接起來。相比單純關注脂質合成酶或成熟型SREBP1，該研究進一步揭示了全長SREBP1在內質網水平的翻譯后調控機制，為MARCHF6–SREBP1軸作為MASLD/MASH潛在治療靶點提供了新的實驗依據。

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【摘要】

研究背景與目的：代謝功能障礙相關脂肪性肝病（MASLD）已成為日益突出的全球健康問題。從頭脂質生成（de novo lipogenesis，DNL）增強是MASLD的重要特征之一，而這一過程主要受固醇調節元件結合蛋白1（SREBP1）調控。然而，調控SREBP1蛋白周轉的翻譯后機制仍不清楚。內質網相關降解（endoplasmic reticulum-associated degradation，ERAD）通路能夠維持蛋白質質量與數量穩態，但其在肝臟脂質代謝中的作用仍有待闡明。本研究聚焦ERAD特異性E3泛素連接酶MARCHF6，探討其在肝臟脂質穩態和MASLD發生發展中的功能。

研究方法：研究團隊構建了肝臟特異性Marchf6敲除小鼠，并結合細胞系和類器官模型，評估Marchf6缺失在普通飼料、高脂飲食（HFD）和西方飲食（WD）條件下對肝臟脂質代謝的影響。研究進一步采用RNA測序、蛋白質組學、生化分析和分子生物學實驗，鑒定MARCHF6調控的分子通路；同時在原代肝細胞、人肝癌細胞和肝類器官中開展功能實驗，以明確MARCHF6與SREBP1之間的機制聯系。

研究結果：MARCHF6在MASLD小鼠模型和人類患者肝組織中均顯著下調。肝臟特異性Marchf6缺失會加重肝臟脂質積累、纖維化和炎癥。轉錄組學和蛋白質組學分析顯示，Marchf6缺失小鼠肝臟中脂質生成相關基因上調，并伴隨SREBP1蛋白水平明顯升高。機制上，MARCHF6可直接與SREBP1相互作用并促進其泛素化，使其進入蛋白酶體降解通路。MARCHF6缺失會延長SREBP1半衰期，從而驅動過度DNL。

研究結論：MARCHF6-ERAD是肝臟脂質代謝的重要調控機制。MARCHF6作為一種固醇結合蛋白，可控制SREBP1蛋白周轉。MARCHF6下調會促進肝脂肪變和MASLD進展，提示MARCHF6可能成為MASLD干預的潛在治療靶點。

01

研究背景及科學問題

代謝功能障礙相關脂肪性肝?。∕ASLD）是一個日益嚴峻的全球健康問題，其疾病譜涵蓋單純性脂肪變、纖維化以及代謝功能障礙相關脂肪性肝炎（MASH）。

固醇調節元件結合蛋白1（SREBP1）是定位于內質網的重要脂質感應因子和轉錄因子。SREBP1經剪切后，其N端成熟片段轉位進入細胞核，從而調控從頭脂質生成（DNL）。已有研究表明，SREBP1水平升高與MASLD密切相關；在小鼠中實驗性表達SREBP1可驅動過度脂質生成和肝脂肪變。這些發現提示，為防止疾病進展，SREBP1蛋白水平必須受到精確調控。

值得注意的是，定位于內質網的全長SREBP1半衰期非常短，約為0.5小時，說明其豐度受到嚴格控制。SREBP1可通過泛素-蛋白酶體降解途徑和溶酶體介導的降解途徑被清除。然而，控制內質網定位SREBP1降解的具體分子機制仍不清楚。

內質網相關蛋白降解（ERAD）是一套關鍵的蛋白穩態調控機制，能夠將錯誤折疊蛋白以及特定功能蛋白靶向至蛋白酶體降解，從而維持蛋白質量和數量平衡。ERAD異常與多種疾病有關，包括糖尿病、肥胖、神經退行性疾病和心血管疾病。在ERAD特異性E3泛素連接酶中，HRD1和MARCHF6是從酵母到人類均高度保守的分子。盡管二者在ERAD通路中并行發揮作用，但它們具有不同的蛋白結構和底物特異性，提示其具有獨特的生物學功能。已有研究顯示，HRD1-ERAD在肝臟多個生理和病理過程中發揮重要作用，但MARCHF6-ERAD在肝臟中的功能仍缺乏系統研究。

本研究發現，MARCHF6在MASLD小鼠模型和人類患者肝組織中均顯著降低。MARCHF6缺失可促進肝臟脂質積累、纖維化和炎癥。MARCHF6作為一種膽固醇結合蛋白，可抑制脂質生成相關基因表達；MARCHF6缺失則導致SREBP1水平升高，從而將MARCHF6-ERAD與DNL調控聯系起來。研究進一步證明，SREBP1是MARCHF6-ERAD的直接底物，提示其在肝臟脂質穩態中存在新的調控機制。基于上述發現，作者認為MARCHF6-ERAD可作為“脂質哨兵”，通過調控SREBP1泛素化和蛋白周轉來維持肝臟脂質代謝；其功能失衡則是MASLD進展的重要驅動因素。因此，靶向MARCHF6-ERAD可能成為MASLD干預的新策略。

02

重要發現及亮點

MASLD模型和患者肝組織中MARCHF6表達下調

研究首先通過全基因組RNA測序分析了常規飲食（RD）與西方飲食（WD）條件下小鼠肝臟基因表達變化。西方飲食由40%脂肪熱量、20%果糖和2%膽固醇組成。差異表達基因的功能通路分析顯示，脂質代謝相關通路發生顯著改變，同時ERAD相關E3泛素連接酶Marchf6 mRNA在西方飲食條件下明顯下調。

進一步通過實時RT-PCR和Western blot檢測，研究團隊驗證了MARCHF6在肝臟樣本中的顯著降低。值得注意的是，另一種ER相關E3泛素連接酶HRD1，也稱SYVN1或synoviolin 1，其表達水平并未出現明顯變化；相比之下，Marchf6是下降最明顯的ER定位E3泛素連接酶。此外，在ob/ob小鼠和蛋氨酸-膽堿缺乏飲食（MCD）誘導的小鼠模型中，肝臟MARCHF6下調也得到獨立驗證。人群數據同樣顯示，與健康個體和肝組織學正常的肥胖個體相比，MASLD和MASH患者肝組織中的MARCHF6 mRNA水平顯著降低。

圖1：MASLD小鼠模型和人類患者肝臟中MARCHF6表達下調。（A）C57BL/6野生型小鼠喂食西方飲食（WD）或常規飲食（RD）12周，隨后對肝組織進行RNA-Seq分析。（B）WD喂食12周后肝組織的蘇木精-伊紅（H&E）染色。（C）火山圖展示（A）中所述肝臟RNA-Seq分析得到的轉錄組數據。（D-E）通過qPCR和Western blot分析驗證與（C）對應的肝臟樣本中MARCHF6 mRNA和蛋白水平（n=8–12）。（F）比較（B）中WD組和RD組之間ER定位E3連接酶mRNA水平。（G）基于GSE126848數據，分析健康對照者（n=13）、肝組織學正常的肥胖個體（n=12）、MASLD患者（n=15）或MASH患者（n=16）肝臟樣本中的MARCHF6表達水平。，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.0001。

肝臟特異性Marchf6缺失在普通飼料條件下即可誘導肝脂質積累

為進一步探討MARCHF6在肝臟代謝重編程和脂質代謝中的作用，研究團隊將Marchf6^floxed/floxed小鼠與Albumin-Cre小鼠雜交，構建肝臟特異性Marchf6敲除小鼠，即Marchf6^floxed/floxed, Albumin-Cre+，文中簡稱Marchf6^Alb小鼠。qPCR和Western blot結果證實，Marchf6基因在肝臟中被成功刪除。Marchf6^Alb雌雄小鼠均具有生育能力，后代基因型符合孟德爾遺傳規律。與Marchf6^f/f對照小鼠相比，Marchf6^Alb小鼠體重僅輕度降低。肝功能檢測顯示，丙氨酸轉氨酶（ALT）和天冬氨酸轉氨酶（AST）水平在兩組間相當。與此同時，X-box binding protein 1 splicing（Xbp1s）、DNA damage-inducible transcript 3（Ddit3，又稱Chop）、Heat shock protein 90kDa beta member 1（Hsp90b）、Eukaryotic translation initiation factor 2-alpha kinase 3（Eif2ak3）和Endoplasmic Reticulum to Nucleus Signaling 1（Ern1）等ER應激標志物未在Marchf6^Alb肝臟中升高，提示Marchf6缺失并未誘導明顯ER應激。

肝臟是調控葡萄糖和脂質代謝的核心器官。葡萄糖耐量實驗顯示，Marchf6^Alb小鼠和Marchf6^f/f小鼠血糖水平相當，且兩組均表現出正常葡萄糖耐量。胰島素耐量實驗也顯示，兩組小鼠對胰島素均有良好反應。值得注意的是，8月齡而非4月齡Marchf6^Alb小鼠肝臟呈黃褐色，而Marchf6^f/f小鼠肝臟呈紅色，提示老齡Marchf6^Alb小鼠肝臟發生脂質積累。H&E染色進一步確認，Marchf6^Alb小鼠肝細胞內出現透明空泡樣脂滴。肝臟甘油三酯（TG）水平顯著升高，而總膽固醇水平未發生變化。進一步分析膽固醇穩態后發現，盡管總膽固醇未變，Marchf6^Alb小鼠肝臟游離膽固醇水平顯著升高，而大部分酯化膽固醇無顯著差異。這些結果支持MARCHF6是肝臟膽固醇和甘油三酯穩態的重要調控因子。與此一致，Marchf6缺失也使Marchf6^Alb小鼠原代肝細胞中的中性脂質積累明顯增加。

圖2：普通飼料喂養條件下，肝臟Marchf6缺失誘導肝臟脂質積累。（A）Marchf6野生型等位基因和靶向等位基因結構示意圖。（B-C）通過qPCR和Western blot檢測肝臟MARCHF6 mRNA和蛋白水平（n=5）。（D）Marchf6^Alb和Marchf6^f/f雄性小鼠禁食過夜后注射D-葡萄糖（1 g/kg），并使用血糖監測試劑盒檢測血糖水平（n=5）。（E）8月齡Marchf6^Alb和Marchf6^f/f小鼠肝臟形態。（F）（E）中肝組織的H&E染色。（G）在禁食過夜并復食3小時條件下，檢測Marchf6^Alb和Marchf6^f/f雌雄小鼠肝臟TG和游離膽固醇含量（n=5）。（H-I）Marchf6^Alb和Marchf6^f/f小鼠原代肝細胞的代表性共聚焦顯微圖像、脂滴（LD）數量和脂滴面積（n=5）。*p<0.05，**p<0.01。

MARCHF6缺失促進人肝癌細胞和肝類器官中中性脂質積累

為考察人源MARCHF6在脂質代謝中的功能，研究團隊采用兩種獨立的短發夾RNA（shRNA）構建體沉默HepG2細胞中的MARCHF6表達，并通過qPCR和Western blot確認敲低效率。結果顯示，MARCHF6缺失導致HepG2細胞中性脂質顯著積累。ImageJ定量分析進一步表明，沉默MARCHF6后，細胞內脂滴數量和脂滴大小均顯著增加。

研究還發現，在HeLa細胞中敲低MARCHF6同樣會顯著增加中性脂質積累，提示MARCHF6對脂質代謝的調控可能并不局限于肝細胞。為了在更接近人體生理狀態的系統中驗證這一發現，研究進一步采用人肝類器官模型。結果顯示，MARCHF6缺失的人肝類器官中性脂質積累明顯增強，脂滴數量更多、體積更大，與小鼠肝臟和人肝癌細胞中的表型高度一致。

圖3：MARCHF6缺失誘導人源細胞和類器官中的脂質積累。（A）表達對照shRNA或靶向人MARCHF6 shRNA的HepG2細胞中MARCHF6相對表達水平（n=3）。（B）采用BODIPY 493/503對中性脂質進行染色。圖中展示表達對照shRNA或靶向人MARCHF6 shRNA的HepG2細胞代表性共聚焦顯微圖像。（C）對（B）中每個細胞基礎狀態下脂滴數量（左圖）和脂滴面積（右圖）進行定量分析（n=5）。（D）肝類器官構建示意圖。比例尺=100 μm。hiPSC，誘導性人多能干細胞；DE，定形內胚層；FGS，前腸球體；HO，肝類器官；LVKD，慢病毒敲低。（E）代表性免疫熒光圖像，顯示MARCHF6（紅色）、白蛋白（灰色）、慢病毒GFP（綠色）和DAPI（藍色）。比例尺=50 μm。（F）基于免疫熒光圖像定量分析肝類器官中的MARCHF6蛋白水平。（G）有無MARCHF6敲低條件下，肝類器官脂滴染色的代表性圖像。比例尺=60 μm。（H）脂滴平均面積定量分析，n=5。（I）肝類器官中每個視野總脂滴面積定量分析（n=5）。

轉錄組和蛋白質組篩選顯示Marchf6缺失上調從頭脂質生成相關基因

為解析MARCHF6調控肝臟脂質代謝的分子機制，研究團隊在普通飼料條件下，對Marchf6^Alb和Marchf6^f/f小鼠肝組織進行了轉錄組和蛋白質組分析。RNA-seq結果顯示，與Marchf6^f/f對照小鼠相比，Marchf6^Alb小鼠肝臟中有123個基因表達顯著降低、181個基因表達升高，其中包括預期中的Marchf6自身表達下降。功能富集分析顯示，脂質和脂肪酸（FA）代謝相關基因顯著上調。尤其是脂肪酸生物合成與攝取、甘油三酯代謝相關關鍵基因在Marchf6^Alb肝臟中顯著升高。qPCR進一步驗證了Acaca、Acacb和Fasn等關鍵脂質生成基因的上調。相反，控制膽固醇生物合成的相關基因整體水平相當。

在蛋白質組學層面，研究團隊提取Marchf6^Alb和Marchf6^f/f小鼠肝臟總蛋白，經胰蛋白酶消化、標記后，采用高效液相色譜-質譜（HPLC-MS）進行定量。此前報道的MARCHF6底物Sterol-C5-Desaturase（SC5D）在Marchf6^Alb肝臟中顯著升高。與RNA-seq結果一致，通路分析顯示，與Marchf6^f/f對照相比，Marchf6^Alb小鼠肝臟中脂肪酸、類固醇和甘油三酯代謝發生紊亂。從頭脂質生成涉及一系列酶促反應，包括ATP citrate lyase（ACLY）、acetyl-CoA carboxylases（ACC1和ACC2）、fatty acid synthase（FASN）和stearoyl-CoA desaturase-1（SCD1）。研究發現，這些脂質生成酶在Marchf6^Alb肝臟中均升高；此外，甘油三酯代謝和脂肪酸轉運相關蛋白也同步上調。這些結果說明，MARCHF6是從頭脂質生成的重要負向調控因子。

圖4：轉錄組和蛋白質組篩選顯示Marchf6^Alb肝臟中從頭脂質生成相關分子上調。（A）RNA-seq和蛋白質組學分析流程圖，用于鑒定Marchf6^Alb與Marchf6^f/f肝臟之間的差異表達mRNA（DEGs）和差異豐度蛋白（DAPs）。（B）火山圖展示Marchf6^Alb與Marchf6^f/f肝臟之間的DEGs。（C）對（B）中鑒定出的上調DEGs進行基因本體（GO）功能分析。（D）熱圖展示與脂肪酸生物合成、TG代謝過程、生物合成過程和脂肪酸轉運相關的上調基因。（E）通過qPCR檢測脂質生成基因Acaca、Acacb、Fasn和Hmgcr的相對表達（n=4）。（F）火山圖展示定量蛋白質組學鑒定出的Marchf6^Alb與Marchf6^f/f肝臟之間的DAPs。（G）對（F）中鑒定出的上調DAPs進行GO功能分析。（H）從頭脂肪酸生物合成過程中由ATP citrate lyase（ACLY）、acetyl-CoA carboxylase（ACC）、fatty acid synthase（FASN）和stearoyl-CoA desaturase-1（SCD1）催化的一系列協調酶促反應流程圖。（I）熱圖展示與脂肪酸生物合成、TG代謝過程、生物合成過程和脂肪酸轉運相關的上調蛋白。*p<0.05。

MARCHF6缺失導致肝細胞和肝臟中SREBP1積累

MARCHF6是一種定位于內質網膜的蛋白，那么它如何引起脂質生成基因變化？為回答這一問題，研究團隊使用Ingenuity Pathway Analysis（IPA）中的上游調控因子分析（Upstream Regulator Analysis，URA）工具，根據協調性差異基因表達（DGE）預測潛在上游轉錄因子。分析結果顯示，SREBP1和SREBP2是預測中最顯著激活的上游轉錄因子。

SREBP1主要促進脂質生成和甘油三酯合成，而SREBP2則參與膽固醇攝取和合成。Marchf6^Alb小鼠肝臟甘油三酯水平顯著升高，而膽固醇生物合成基因整體未出現明顯差異，因此研究重點轉向MARCHF6對SREBP1上調的調控作用。結果顯示，在MARCHF6敲低的HepG2細胞和HeLa細胞中，SREBP1蛋白水平明顯增加；Marchf6^Alb小鼠肝臟中SREBP1蛋白同樣升高。

為了明確MARCHF6是否作為SREBP1的E3泛素連接酶發揮作用，研究團隊進行了共免疫沉淀（Co-IP）和免疫印跡分析。在瞬時轉染的HEK293細胞中，SREBP1可與野生型MARCHF6以及催化失活型MARCHF6突變體C9A相互作用。然而，只有野生型MARCHF6能夠增加SREBP1泛素化，C9A突變體則不能。與此一致，在HepG2細胞中敲低MARCHF6會顯著增強內源性SREBP1泛素化，并通過環己酰亞胺（CHX）追蹤實驗顯示全長SREBP1半衰期延長。相比之下，CHX處理后剪切型SREBP1水平相當。蛋白酶體抑制劑MG132可在很大程度上挽救CHX誘導的SREBP1降解。這些結果共同表明，MARCHF6可作為SREBP1的E3泛素連接酶，直接靶向SREBP1，使其發生泛素化并經蛋白酶體降解。

MARCHF6含有14個跨膜結構域，其中包括一個固醇感應結構域（sterol-sensing domain，SSD）。序列同源性比較顯示，MARCHF6中的推定SSD與HMGCR、SCAP和NPC1中的經典SSD具有結構相似性。蛋白質組范圍的膽固醇相互作用蛋白圖譜也提示，MARCHF6可能是一種膽固醇結合蛋白。為驗證其膽固醇結合能力，研究團隊在293T細胞中重組表達野生型MARCHF6及Y337A&L363F突變體，并使用trans-sterol探針處理細胞。經CuAAC反應連接疊氮-生物素標簽后，研究者使用鏈霉親和素磁珠純化蛋白，并通過SDS-PAGE分析。結果顯示，野生型MARCHF6而非Y337A&L363F突變體在膽固醇探針處理組中顯著富集，證明其具有膽固醇結合活性。此外，與標準胎牛血清（FBS）培養條件相比，在脂蛋白缺乏血清（LPDS）培養條件下，MARCHF6與SREBP1之間的相互作用顯著減弱，提示這種相互作用具有脂質依賴性。

圖5：轉錄因子SREBP1是MARCHF6的底物。（A-B）采用Ingenuity Pathway Analysis（IPA）中的上游調控因子分析（URA），對Marchf6^Alb肝臟中上調轉錄因子進行生物信息學分析。（C）MARCHF6敲低HepG2細胞中全長和剪切型SREBP1蛋白水平。（D）HFD喂養12周條件下，Marchf6^Alb和Marchf6^f/f肝臟中全長和剪切型SREBP1蛋白水平。（E）在瞬時轉染的HEK293T細胞中，野生型（WT）MARCHF6或催化失活型（C9A）MARCHF6與SREBP1之間的相互作用。（F）在293T細胞中表達Myc-MARCHF6^WT或Myc-MARCHF6^C9A后，對Flag-SREBP1進行泛素化分析。（G）對對照組和MARCHF6敲低HepG2細胞中的內源性SREBP1進行泛素化分析。（H）環己酰亞胺（CHX）追蹤實驗顯示，對照組和MARCHF6敲低HepG2細胞在對照處理或MG132處理6小時后SREBP1蛋白穩定性變化。（I）MARCHF6可能含有固醇感應結構域。圖中展示MARCHF6預測拓撲結構，并標示推定SSD。將MARCHF6中的Tyr-337和Leu-363與所示蛋白進行序列比對。（J）固醇光反應可點擊探針結構。（K-L）活細胞trans-sterol探針處理流程。293T細胞轉染Myc標記的MARCHF6，并使用10 μM trans-sterol探針處理，在365 nm紫外照射后進行點擊化學反應，經鏈霉親和素磁珠純化，并通過SDS-PAGE分析檢測。

肝臟Marchf6缺失加重高熱量飲食誘導的肝脂肪變、炎癥和纖維化

為研究MARCHF6在代謝應激條件下對肝臟脂質代謝的影響，研究團隊從6周齡開始給Marchf6^Alb和Marchf6^f/f小鼠喂食高脂飲食（HFD），其中脂肪供能占45 kcal%，這是常用于誘導肝脂肪變的飲食模型。兩組小鼠體重無明顯差異。HFD喂養12周后，Marchf6^Alb小鼠出現肝腫大，肝臟顏色呈淺黃色。組織學染色證實，Marchf6^Alb小鼠肝臟發生大量脂質積累；與Marchf6^f/f同窩對照相比，其肝臟和血清甘油三酯、膽固醇水平明顯升高。肝脂肪變可引起慢性肝損傷。與此一致，在HFD條件下，Marchf6^Alb小鼠血清ALT和堿性磷酸酶（ALP）水平均顯著高于Marchf6^f/f小鼠。此外，HFD喂養后Marchf6^Alb小鼠葡萄糖反應也受到損害。

HFD能夠穩定誘導肥胖和肝脂肪變，但通常不會形成伴有肝纖維化的MASH。為進一步研究MARCHF6在MASLD進展中的作用，研究團隊給Marchf6^Alb和Marchf6^f/f小鼠喂食西方飲食（WD）。僅12周后，Marchf6^Alb小鼠即表現出肝腫大、肝重/體重比顯著升高以及脂質水平增加。組織學分析顯示，Marchf6^Alb小鼠肝臟出現嚴重脂肪變。天狼星紅染色進一步顯示，與Marchf6^f/f對照相比，Marchf6^Alb肝組織中膠原纖維更多。Bulk RNA-seq數據表明，脂質生物合成過程和脂肪酸生物合成過程相關基因顯著增加；同時，膠原纖維組織、炎癥反應和趨化因子產生相關基因也在上調基因中富集，提示Marchf6^Alb小鼠出現MASH樣表型。

為直接檢驗Marchf6缺失誘導的肝臟表型是否可逆，研究團隊在Marchf6^Alb小鼠中通過AAV重新表達MARCHF6，隨后誘導MASLD。結果顯示，肝臟重新表達MARCHF6可有效恢復MARCHF6蛋白表達，并在很大程度上挽救西方飲食喂養Marchf6^Alb小鼠的肝脂肪變和纖維化。

圖6：肝臟MARCHF6缺失加重高熱量飲食誘導的肝脂肪變、炎癥和纖維化。（A）Marchf6^Alb和Marchf6^f/f小鼠喂食高脂飲食（HFD）或西方飲食（WD）12周，隨后對肝臟和血清進行組織學及生化分析。（B）HFD喂養12周后Marchf6^Alb和Marchf6^f/f小鼠肝臟形態變化及肝重，n=4。（C）檢測（B）中Marchf6^Alb和Marchf6^f/f肝臟的TG水平（n=4）。（D）（B）中肝組織油紅O染色。（E）HFD喂養12周后Marchf6^Alb和Marchf6^f/f小鼠血清ALT水平（n=4）。（F）WD喂養12周后Marchf6^Alb和Marchf6^f/f小鼠肝臟形態變化。（G）WD喂養12周后Marchf6^Alb和Marchf6^f/f小鼠肝重及肝重/體重比（n=4）。（H）（F）中肝組織H&E染色和天狼星紅染色。（I）WD喂養12周后，對Marchf6^Alb和Marchf6^f/f小鼠肝臟上調基因進行基因本體（GO）富集分析，展示主要富集通路。（J-L）熱圖展示（I）中與脂肪酸生物合成（J）、膠原纖維組織（K）和先天免疫反應（L）相關的上調基因。**p<0.01。

SREBP1介導MARCHF6與肝臟脂質積累之間的聯系

為驗證MARCHF6是否通過SREBP1調控脂質積累和MASLD發展，研究團隊構建并驗證了一種表達靶向Srebf1 shRNA的腺相關病毒（AAV-shSrebf1），并在注射7天后確認其有效性。結果顯示，AAV-shSrebf1處理顯著降低Marchf6^Alb小鼠肝重/體重比，提示MARCHF6在很大程度上通過SREBP1調控脂質代謝。組織學染色也顯示，AAV-shSrebf1處理后，Marchf6^Alb小鼠肝臟脂質積累和纖維化在很大程度上得到改善。

為進一步驗證SREBP1是否介導MARCHF6對人源細胞脂質積累的影響，研究團隊在MARCHF6敲低的穩定HepG2細胞系中，使用兩種獨立shRNA構建體沉默SREBP1。Western blot確認SREBP1被成功敲低。結果顯示，在MARCHF6敲低HepG2細胞中進一步去除SREBP1，可顯著降低中性脂質積累。定量分析顯示，MARCHF6缺失會增加每個細胞中的脂質面積和脂滴大小，而SREBP1敲低可顯著抑制這一效應。這些發現說明，SREBP1是連接MARCHF6與肝臟脂質積累的關鍵介質。

圖7：SREBP1介導MARCHF6與脂質積累之間的聯系。（A）Marchf6^Alb和Marchf6^f/f小鼠給予AAV-Con或AAV-shSrebf1處理1周后，再喂食西方飲食12周，隨后進行肝組織學分析。（B）（A）中Marchf6^Alb和Marchf6^f/f小鼠肝臟形態變化。（C）（A）中小鼠肝重/體重比（n=5）。（D-E）（B）中肝組織H&E染色和天狼星紅染色。（F）MARCHF6敲低HepG2細胞及其親本細胞中SREBP1敲低效率。（G）表達對照shRNA或靶向人SREBP1 shRNA的HepG2細胞代表性共聚焦顯微圖像。（H-I）對（G）中每個細胞基礎狀態下脂滴數量（左圖）和脂滴面積（右圖）進行定量分析（n=5）。*p<0.05，**p<0.01。

【Citation】:Xu Y, Yue T, Batbold U, Magassa A, Liu K, Jiang L, Liu D, Hoang Do LN, Liu X, Yang L, Yu J, Wu S, Fang D, Yang X, Wang H, Zhang X, Leng L, Wei J. MARCHF6 orchestrates hepatic lipid homeostasis by targeting SREBP1 for ER-associated degradation.Journal of Hepatology.2026.

【貢獻】★★★★★

綜上，本研究闡明了一條由MARCHF6-ERAD參與的新型反饋調控環路。該環路可響應脂質波動，并通過SREBP1-DNL軸調節肝臟脂質合成。這一發現加深了對肝臟脂質代謝調控機制的理解。研究首次證明，MARCHF6-ERAD功能失衡參與MASLD發病過程，并提示MARCHF6–SREBP1軸可能成為代謝性肝病干預的重要機制靶點。

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?可發布內容包括：(1) 博士后招聘；(2) 博士、碩士招生；(3) 科研助理、實驗技術員招聘；(4) 青年PI/高層次人才招聘；(5) 課題組介紹與成果推廣；(6) 學術會議、論壇與培訓班宣傳；(7) 科研平臺、技術服務與合作項目推廣。
我們將結合團隊研究方向和公眾號讀者特點，提供專業、清晰、精準的圖文展示，幫助優質課題組和科研平臺觸達更多相關領域讀者。如需發布招聘或合作推廣信息，歡迎通過公眾號后臺聯系。

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