四川
為得出這一結論，研究人員聚焦于瓜納卡斯特保護區，這是位于哥斯達黎加西北部的一片16.9萬公頃的保護區。該地區擁有全球最完整的生物多樣性清單之一，這份清單歷時四十多年編制而成。基于這一樣本庫并布設陷阱，研究人員逐一測序了160萬只熱帶昆蟲的DNA。這套方法使他們鑒定出5.4萬個物種。
但即便付出了如此努力，仍未能窮盡所有物種，因為無論捕獲多少，總會有物種漏網。為了覆蓋更廣的范圍并估算遺漏的物種，他們將微姬蜂亞科（Microgastrinae）寄生蜂納入研究——這是地球上最多樣化的類群之一。通過將已發現的昆蟲物種與以微姬蜂亞科為參照推算出的尚未被發現物種進行比較，他們得出結論：瓜納卡斯特保護區內可能約有33.3萬種昆蟲。這一數字成為基礎，用以推算全球的估計值，最終得出1400萬至2000萬種。
康涅狄格大學教授、科羅拉多大學自然歷史博物館昆蟲學家、研究合著者羅伯特·K·科爾韋爾解釋說，描述并命名所有這些物種以查明其數量幾乎是一項不可能完成的任務。即使分類學家組成一支大軍，“微小的昆蟲是如此超多樣性，以至于他們每天都必須描述數百個新物種，”他指出。因此，研究人員轉向使用DNA。一旦獲得片段，就將其與保存在加拿大的一座巨型數據庫中的信息進行比對，該數據庫存儲了數百萬條基因條形碼。這樣就能確認樣本是已知物種還是新發現。
參與研究機構之一的瓜納卡斯特干旱森林保護基金在一份聲明中指出，該研究證明，如果僅使用單一采樣方法，就會有大量物種隱藏不見。但將各種方法結合起來，并將該地區不同生物類群（包括樹木、兩棲動物和蛾類）的情況進行對比，就會發現93%至97%的昆蟲仍未得到描述。
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